Identification du rôle de la PARP-2 dans la réponse aux dommages à l’ADN via la voie de recombinaison homologue, à la suite d’une exposition à un rayonnement ionisant.
Les cassures d’ADN double-brin sont particulièrement toxiques compromettant la survie cellulaire. Un mécanisme de réparation appelé recombinaison homologue (RH) permet de restaurer l’intégrité génétique de la cellule. La réparation par RH implique des étapes successives. Ce processus est initié par la synthèse de poly(ADP-ribose) jouant un rôle central dans l’organisation spatio-temporelle de la RH. L’ajout de résidus ADP-ribose est catalysé par les membres de la famille des poly(ADP-ribose) polymérases. La contribution de PARP-2 dans la RH demeure peu documentée. Sachant que le PAR synthétisé par la PARP-2 possède certaines caractéristiques et dynamiques distinctes. Son rôle de signalisation pourrait engendrer un recrutement spécifique de protéines impliquées dans la RH. Ce projet est décomposé en trois objectifs majeurs : préciser le rôle de PARP-2 dans la RH ; identifier de nouveaux interacteurs de PARP-2 et ses substrats spécifiquement PARylés par purification d’affinité couplée à la spectrométrie de masse ; évaluer des candidats d’intérêts identifiés pour leur capacité à induire un phénomène de létalité synthétique avec des inhibiteurs de PARP utilisés en clinique. Nos résultats préliminaires indiquent qu’en absence de PARP-2, la RH et le recrutement de RAD51 sont significativement réduits. Un répertoire de plusieurs centaines de protéines associées aux complexes PARP-2 a été généré au terme d’analyses protéomiques. Quelques candidats sélectionnés pour leur abondance relative dans des complexes PARP-2/PAR sont en cours de validation. Ce travail permettra de souligner l’importance de facteurs de RH dans la sensibilité des cellules cancéreuses aux inhibiteurs de PARP et pourrait contribuer au développement d’approches thérapeutiques ciblées.