Présentation

La plateforme de cytométrie du Centre de recherche du CHU de Québec est parmi les mieux équipés au Canada. Nous offrons une gamme de services d’analyse et de tri cellulaire avec sept appareils à la fine pointe de la technologie.

Analyse multiparamétrique

  • Fluorescence
  • Analyse multiparamétrique de cytométrie de masse (CyTOF)
  • Détection d’ARN
  • Vésicules extracellulaires (exosomes, microparticules)

Tri cellulaire (jusqu’à 4 sous-populations simultanément)

  • Fluorescence
  • Vésicules extracellulaires (exosomes, microparticules)

Équipements disponibles à la plateforme

BD SORP LSR II (5 lasers: 13 couleurs)

Appareil personnalisé muni de 5 lasers, dont le laser UV 355 nm et le laser vert 532 nm. La configuration de cet appareil permet d’analyser 15 paramètres simultanément ce qui lui confère une capacité et une puissance d’analyse supérieures aux cytomètres de table standards.

Voici quelques applications:

  • Phénotypage multicouleur (Monocytes Inflammatoires, T reg, Th 17, etc.)
  • Cycle cellulaire (PI, Dapi)
  • Flux Calcique

Configuration BD LSR II* & BD FACSAria II**

532 NM (VERT) PE-Cy7
PE-Cy5.5
PE-Cy5
PE-Texas Red
PE, Alexa 546
7-AAD
Alexa 568, PE-CF594
Alexa 555, R555
633 NM (ROUGE) APC-Cy7, APC-H7
APC
Alexa 700
Alexa 647, Alexa 633
488 NM (BLEU) FITC
PerCP
Alexa 488, GFP
PerCP Cy5.5
405 NM (VIOLET) AmCyan
Pacific Blue
Horizon V500
Horizon V450
355 NM (UV)* DAPI, Hoechst Blue
Indo-1 (bleu)
Indo-1 (violet), Alexa 350

BD SORP FACSAria II (5 lasers: 13 couleurs)

Le trieur haute-vitesse BD FACSAria II permet de purifier avec une grande efficacité les sous-populations cellulaires. Grâce à sa configuration jumelle au SORP LSR II, cet appareil permet de trier les populations préalablement identifié par ce dernier.

Voici quelques applications:

  • Tri 1 à 4 voies (4 sous-populations simultanément en 13 couleurs!)
  • Tri en plaque de 96 puits
  • Tri sur la lame de microscope
  • Clonage de populations en plaque de 96 puits
  • Cellules Souches (Side population : Exclusion de Hoechst 33342)

La configuration du FACSAria II est identique à celle du LSR II à l’exception du laser UV.

375 NM (NEAR UV)** DAPI, Hoechst Blue
Hoechst Red
Alexa 350
Stem cell (SP)

Cytométrie de masse (CytoF)

La cytométrie de masse est une technologie combinant la cytométrie de flux et la spectrométrie de masse. Avec le Helios CytoF, il est possible d’analyser plus de 40 paramètres simultanément sur une seule cellule.

Le Centre de Recherche du CHU de Québec est parmi l’un des seuls établissements possédant cette technologie au Canada.

Voici quelques applications :

  • Phénotypage cellulaire
  • Cycle cellulaire

 

 

 

 

 

BD Accuri C6 (4 couleurs)

Le BD Accuri C6 est un cytomètre en flux (4 couleurs) caractérisé principalement par sa facilité d’utilisation. Cet appareil possède la capacité d’effectuer du compte absolu des populations cellulaires, permettant ainsi de déterminer leurs concentrations par microlitres (cellules/µl). Le BD Accuri C6 est parfaitement adapté pour le phénotypage en 4 couleurs. De plus, avec sa petite taille, il peut facilement être déplacé pour des analyses directement sur le terrain.

Cet appareil est muni d’un laser bleu (488 nm) et un laser rouge (640 nm).

Voici quelques applications:

  • Numération cellulaire (Compte absolu)
  • Phénotypage multicouleur (4 paramétres)
  • Cycle cellulaire (PI)

Configuration BD Accuri C6

488 NM (BLEU) FITC/GFP
PE
PerCP/PerCP-Cy5.5
Alexa 488
PI
PE-Cy7
640 NM (ROUGE) APC Alexa 647

BD FACSCanto II (6 et 8 couleurs)

Le laboratoire de cytométrie est équipé de 2 appareils BD FACSCanto II, un à 2 lasers -8 paramètres, l’autre à 3 lasers-10 paramètres. Ces derniers sont chacun munis d’un chargeur de carrousel de 40 tubes. La configuration de ces deux appareils comble la majorité des besoins manifestés en cytométrie par les laboratoires modernes.

De plus, le module d’automatisation sur le BD FACSCanto II permet de prendre en charge l’analyse de grandes quantités d’échantillons.

Voici quelques applications:

  • Phénotypage multicouleur (10 paramétres)
  • Cycle cellulaire (PI)
  • Protéines Fluorescentes (GFP et autres)
  • Apoptose (annexin V, caspase, etc)
  • Nécrose
  • Quantification médiateurs cellulaires (CBA)

Configuration BD FACSCanto II

488 NM (BLEU) PE-Cy7
PerCP, PerCP Cy5.5
PE
FITC
SSC
PI
Alexa 488, GFP
633 NM (ROUGE) APC-Cy7
APC
405 NM (VIOLET) AmCyan
Pacific Blue
Horizon V500
Horizon V450