Dérivation et cryopréservation

Les services de dérivation et de cryopréservation offerts par le Centre de recherche du CHU de Québec-Université Laval sont accessibles autant aux chercheurs du CHU qu’aux chercheurs affiliés avec l’Université Laval ou encore aux chercheurs à l’externe.

Le Centre de recherche du CHU de Québec-Université Laval vous propose différentes options pour préserver vos lignées de souris à partir de sperme ou d’embryons. Nous offrons aussi le service de redérivation ou de décongélation d’embryons ou de sperme. Il nous fera plaisir de vous aider à choisir la méthode appropriée selon la lignée de souris avec laquelle vous travaillez.

Des solutions avantageuses pour...

  • Conserver des lignées non utilisées dans l'immédiat
  • Réduire les coûts de maintien d'une lignée en animalerie
  • Protéger des lignées en cas de force majeure (feu, inondation, etc.)
  • Permettre la décontamination d'une lignée ou d'une salle d'hébergement
  • Permettre l'échange de lignées entre chercheurs
  • Prévenir la dérive d'une lignée et diminuer la variabilité des résultats
  • Sauver une lignée improductive
  • Etc.

Tarification 2017

Services offerts

Cryopréservation de sperme

Pour cette procédure, vous devez fournir un minimum de 2 mâles âgés entre 3 et 6 mois. S’il s’agit d’un sauvetage de lignée, il est possible d’effectuer la procédure avec un seul mâle, cependant, le rendement peut en être affecté.

La procédure consiste à récolter les queues d’épididymes et d’en extraire les spermatozoïdes afin de les congeler. Pour s’assurer de la viabilité du sperme, une validation sera effectuée. Celle-ci consiste à décongeler une paille de sperme cryopréservé, à effectuer une fécondation in-vitro puis à observer une première division cellulaire à l’incubation (stade deux cellules). Si le taux de fertilisation est adéquat, le lot de sperme sera validé .

Prendre note que, lors de la décongélation du sperme cryopréservé, la fécondation se fera à partir d’ovules de femelles « wildtype » (fond génétique correspondant à celle de votre lignée). Par exemple, si le sperme d’un mâle homozygote est cryopréservé, les souris produites suite à une décongélation seront automatiquement hétérozygotes et que des croisements seront nécessaires si vous désirez obtenir des souris homozygotes.

Le coût de cette procédure inclut les éléments suivants :

  • Une garantie de 18 pailles de sperme cryopréservé
  • La validation à deux cellules* 
  • Deux ans d’entreposage de la lignée


*Une validation plus complexe (bébés vivants) peut être effectuée sur demande mais des frais supplémentaires sont à prévoir. La validation « bébés vivants » consiste à décongeler une paille de sperme cryopréservé, à effectuer une fécondation in vitro puis à implanter les embryons produits chez une femelle pseudo gestante.

Cryopréservation d’embryons (accouplement naturel)

Pour cette procédure, vous devez fournir un minimum de 10 à 30 mâles ainsi que 10 à 30 femelles (quantité variable en fonction du fond génétique de la lignée à cryopréserver).

La procédure consiste à mettre des femelles superovulées en contact avec les mâles afin de récolter les embryons pour les cryopréserver. Pour s’assurer de la viabilité des embryons congelés, une validation sera effectuée. Celle-ci consiste à décongeler une paille d’embryons cryopréservés et à observer la division cellulaire à l’incubation. Si le taux de développement est adéquat, le lot d’embryons sera validé.

Le coût de cette procédure inclut les éléments suivants :

  • Une garantie de 250 embryons à deux cellules, donc 10 pailles d’environ 25 embryons cryopréservés
  • La validation* (vérification de la viabilité des embryons cryopréservés en incubateur)
  • Deux ans d’entreposage de la lignée

*Une validation plus complexe (bébés vivants) peut être effectuée sur demande mais des frais supplémentaires sont à prévoir. La validation « bébés vivants » consiste à décongeler une paille d’embryons cryopréservés et à les implanter chez une femelle pseudo gestante.

Cryopréservation d’embryons (IVF)

Pour cette procédure, vous devez fournir soit 2 mâles pour obtenir du sperme frais ainsi que 20 à 25 femelles ou encore 2 pailles de sperme congelé et 20 à 25 femelles.

La procédure consiste à récolter les ovules de femelles superovulées pour effectuer une fécondation in vitro avec le sperme frais ou congelé. Les embryons obtenus seront cryopréservés. Pour s’assurer de la viabilité des embryons congelés, une validation sera effectuée. Celle-ci consiste à décongeler une paille d’embryons cryopréservés et à observer la division cellulaire à l’incubation. Si le taux de développement est adéquat, le lot d’embryons sera validé.

Le coût de cette procédure inclut les éléments suivants :

  • Une garantie de 250 embryons à deux cellules, donc 10 pailles d’environ 25 embryons cryopréservés
  • La validation* (vérification de la viabilité des embryons cryopréservés en incubateur)
  • Deux ans d’entreposage de la lignée

*Une validation plus complexe (bébés vivants) peut être effectuée sur demande mais des frais supplémentaires sont à prévoir. La validation « bébés vivants » consiste à décongeler une paille d’embryons cryopréservés et à les implanter chez une femelle pseudo gestante.

Dérivation avec cryopréservation de sperme

Cette procédure permet la décontamination d’une lignée tout en profitant des avantages d’une cryopréservation. Pour cette procédure, vous devez fournir un minimum de 2 mâles âgés entre 3 et 6 mois. Il est possible d’effectuer la procédure avec une seul mâle, cependant, le rendement peut en être affecté.

La procédure consiste à récolter les queues d’épididymes afin d’en extraire les spermatozoïdes et de les congeler. Pour s’assurer de la viabilité du sperme, une validation sera effectuée. Celle-ci consiste à décongeler une paille de sperme cryopréservé, à effectuer une fécondation in vitro puis à observer une première division cellulaire à l’incubation (stade deux cellules). Les embryons obtenus seront implantés chez des femelles pseudo-gestantes. Une fois les bébé sevrés, un bilan de santé sera effectué avant le transfert des animaux au chercheur. Les frais relatifs à ce bilan de santé ne sont pas inclus dans le coût de la procédure.

Le coût de cette procédure inclut les éléments suivants :

  • Une garantie de 18 pailles de sperme cryopréservé
  • Une garantie minimum d’un couple (1 mâle et 1 femelle)
  • Deux ans d’entreposage de la lignée

Prendre note que la fécondation se fera à partir d’ovules de femelles « wildtype » (fond génétique correspondant à celle de votre lignée). Par exemple, si le sperme d’un mâle homozygote est cryopréservé, les souris produites suite à une décongélation seront automatiquement hétérozygotes et que des croisements seront nécessaires si vous désirez obtenir des souris homozygotes.

Dérivation avec cryopréservation d’embryons

Cette procédure permet la décontamination d’une lignée tout en profitant des avantages d’une cryopréservation. Pour cette procédure, vous devez fournir soit 2 mâles pour obtenir du sperme frais ainsi que 20 à 25 femelles ou encore 2 pailles de sperme congelé et 20 à 25 femelles.

La procédure consiste à superovuler les femelles pour en récolter les ovules et procéder à une fécondation in vitro avec le sperme frais ou congelé. Les embryons obtenus seront cryopréservés et une paille d’embryons sera utilisée pour implantation chez une femelle pseudo-gestante. Une fois les bébés sevrés, un bilan de santé sera effectué avec le transfert des animaux au chercheur. Les frais relatifs à ce bilan de santé ne sont pas inclus dans le coût de la procédure.

Le coût de cette procédure inclut les éléments suivants :

  • Une garantie de 10 pailles d’embryons cryopréservés
  • Une garantie minimum d’un couple (1 mâle et 1 femelle)
  • Deux ans d’entreposage de la lignée

Dérivation par transfert d’embryons

Cette procédure est idéale pour redériver une lignée contaminée mais n’offre pas la possibilité de conserver des embryons pour le futur. Pour cette procédure, vous devez fournir soit 5 à 10 mâles ainsi que 5 à 10 femelles (quantité variable en fonction du fond génétique de la lignée à cryopréserver).

La procédure consiste à superovuler les femelles, à les mettre en contact avec les mâles, à récolter les embryons pour les implanter directement chez des femelles pseudo gestantes. Une fois les bébés sevrés, un bilan de santé sera effectué avant le transfert des animaux au chercheur. Les frais relatifs à ce bilan de santé ne sont pas inclus dans le coût de la procédure.

Le coût cette procédure inclut une garantie d’un minimum de 8 naissances.

Décongélation de sperme

Pour cette procédure, vous devez fournir une à deux pailles de sperme cryopréservé. La procédure consiste à décongeler le sperme, à effectuer une fécondation in-vitro puis à implanter les embryons produits chez des femelles pseudo gestantes.

Prendre note que la fécondation se fera à partir d’ovules de femelles « wildtype » (fond génétique correspondant à celle de votre lignée). Par exemple, si le sperme d’un mâle homozygote est cryopréservé, les souris produites suite à une décongélation seront automatiquement hétérozygotes et que des croisements seront nécessaires si vous désirez obtenir des souris homozygotes.

Le coût de cette procédure vous garantie 10 naissances de bébés. Cette garantie est valide uniquement si le sperme a été congelé par le service des animaleries du CHU de Québec. De plus, dans certains cas, le coût de la procédure peut être sujet à changement (importation, faible taux de fertilisation, etc.)

Décongélation d’embryons

Pour cette procédure, vous devez fournir une à trois pailles d’embryons cryopréservés. La procédure consiste à décongeler les embryons et à les implanter chez des femelles pseudo gestantes.

Le coût de cette procédure vous garantie un couple (1 mâle et 1 femelle). Cette garantie est valide uniquement si les embryons ont été congelés par le service de l’animaleries du CHU de Québec-Université Laval. De plus, dans certains cas, le coût de la procédure peut être sujet à changement (exemple: importation)

Entreposage d’une lignée cryopréservée

Le service de cryopréservation du CRCHU de Québec-Université Laval entrepose gratuitement vos lignées durant les 24 premiers mois suivant une cryopréservation. Par soucis de sécurité, les lignées cryopréservées sont entreposées dans deux réservoirs d’azote liquide indépendants et situés dans deux sites différents.

Dès le 25ème mois, le coût d’entreposage sera facturé annuellement sur le perdiem du mois d’avril à un tarif de 150$/lignée/année.

Prendre note que si vous désirez prendre en charge votre entreposage de lignée cryopréservée, nous ne pourrons honorer notre garantie de naissance lors d’une décongélation.

Méthode de fonctionnement

Voici les principales étapes pour effectuer une demande de dérivation, de cryopréservation ou de décongélation. Toutefois, si vous avez des interrogations ou si vous désirez obtenir des précisions, n’hésitez pas à communiquer avec nous. 

  1. Compléter le FORM-CHU 012 Demande de service de dérivation et de cryopréservation et le soumettre par courriel à Luc.filion@crchudequebec.ulaval.ca
  2. Par la suite, vous recevrez par courriel une soumission avec les coûts détaillés en fonction de la procédure demandée.
  3. Dès que vous aurez accepté la soumission, nous établirons avec vous un échéancier pour débuter la procédure.
  4. Lorsque la procédure est complétée, vous recevrez une facture et les coûts seront inclus à votre facture de perdiem mensuel (interne) . Dans le cas d’une cryopréservation, prendre note que la procédure est complétée uniquement lorsque la validation a été effectuée.
  5. Lors d’une cryopréservation, un certificat sera émis attestant le nom de la lignée qui a été cryopréservée, le # de lot, le nombre de pailles congelées, etc.

Équipe du service de dérivation et de cryopréservation

Luc Filion, TSA
Adjoint aux coordonnateurs, Service de dérivation et de cryopréservation
Téléphone : (418) 525-4444, poste 46035
Courriel : luc.filion@crchudequebec.ulaval.ca

 

Feuillet explicatif

N’hésitez pas à nous contacter pour toute information ou conseil concernant vos lignées de souris.

Au plaisir de vous aider à faire de vos projets de grands succès !